Owoman.ru

Как выявить Хеликобактер пилори | Анализ на Хеликобактер пилори

Материалом исследования для микробиологического выявления Хеликобактер пилори являются биоптаты из СО желудка или двенадцатиперстной кишки, полученной в условиях максимальной стерильности. Инкубация посевов осуществляется в микроаэрофильных условиях при содержании кислорода не более 5%. Такие условия создаются путем заполнения герметически закрывающихся сосудов газовой смесью, при использовании специальных газогенераторных химических пакетов. На кровяной питательной среде хеликобактер на 3-5 сут. формирует мелкие круглые, гладкие, прозрачные, росинчатые колонии диаметром 1-3 мм.

В дальнейшем проводится идентификация выделенных культур, определяются их морфологические, тинкториальные свойства, чувствительность к антибиотикам, подвижность и приводятся другие специальные исследования в зависимости от возможностей и задач, стоящих перед исследователем. Воспользоваться этим методом чтобы выявить Хеликобактер пилори в условиях обычной лаборатории довольно трудно.

Как выявить Хеликобактер пилори?

Как выявить Хеликобактер пилори - гистологические методы

Гистологические методы получили широкое распространение, так как позволяют быстро выявить Хеликобактер пилори в биоптатах и одновременно изучить морфологические изменения в СО. Наиболее простым и доступным метолом выявления Хеликобактер пилори является окраска по Гимзе без дифферениировки. Хеликобактер пилори при этом окрашиваются в темно-синий цвет, они хорошо видны как на поверхности эпителия, так и в глубине ямок. Для оценки состояния СО и обнаружения Хеликобактер пилори достаточно двух биоптагов.

Чтобы выявить Хеликобактер пилори, материалом диагностики может служить любой участок СО желудка и двенадцатиперстной кишки, но при этом обязательно следует исследовать прицельно взятые биоптаты из антрального отдела в 2-3 см от привратника из участка визуально более выраженного воспаления (гиперемия, отек), но не из дна эрозии и язвы. Частота выявления Хеликобактер пилори с помощью гистологического метода хорошо корригирует с другими методами и составляет не менее 75-80%, Результативность метода диагностики Хеликобактер пилори зависит от многих факторов, в том числе и от способа приготовления и окраски препарата, В последнее время разработаны новый анализ на Хеликобактер пилори, который наиболее чувствителен иммуноцитохимический с применением моноклональных антител и комплекса авидин-биотин-пироксидазы.

Весьма обнадеживающие результаты получены при выявлении Хеликобактер пилори методом гибридизации ДНК в обычных парафиновых срезах. Методика не только чувствительна, но и высокоспецифична, с ее помощью можно идентифицировать различные штаммы геликобактера и понять природу повторного выявления Хеликобактер пилори после успешного лечения (новая ли это инфекция или размножение сохранившихся бактерий).

Как выявить Хеликобактер пилори - иммунологические методы

У всех больных, инфицированных Хеликобактер пилори, в СО желудка и соответственно в двенадцатиперстной кишке образуются антитела. Специфический гуморальный иммунный ответ против антигенов геликобактера отчетливо регистрируется через 3-4 недели после инфицирования. Анализ на Хеликобактер пилори может быть проведен различными методами (в реакции преципитации и др.), но наибольшее значение имеет метод иммуноферментного анализа (ИФА). Этим тестом выявляются антитела IgG, IgA, IgM классов в сыворотке крови, а также секреторные IgA. IgM в слюне и содержимом желудка. В практике используют ИФА по определению igGи реже lgA-антител в сыворотке крови.

Этот метод в основном используется с целью выявления инфиированности больных с гастродуоденальной патологией и контроля эффективности антибактериального лечения в отдаленные сроки наблюдения. Преимущество метода состоит в том, что он выявляет факт инфицирования не только при манифестных, но и при субклинических формах, а также в стадии ремиссии заболевания. Следует также иметь в виду, что тест диагностики Хеликобактер пилори остается положительным еще не менее месяца после успешной ликвидации Хеликобактер пилори, а на ранней стадии, в течение 2-3 недель с момента инфицирования, тест оказывается отрицательным.

В настоящее время в практику внедряются более совершенные методы, позволяющие выявить Хеликобактер пилори: полимеразная цепная реакция (ПЦР), определение антигена в кале и др.